一✘▩•↟↟、昆蟲保幼激素(JH)ELISA試劑盒詳細介紹▩↟│▩:
中文名稱:昆蟲保幼激素(JH)ELISA試劑盒
規格: 48T /96T
品牌:臻科生物
種屬:昆蟲ELISA試劑盒
檢測波長:450 nm
所需樣本體積: 50ul
適用範圍:僅供科研•╃▩↟╃,不得用於臨床診斷
儲存及有效期:2-8℃•╃▩↟╃,六個月
檢測樣本種類:用於測定血清•╃▩↟╃,血漿及相關液體等樣本的含量或者表達·☁•。例如適合檢測包括血清✘▩•↟↟、血漿✘▩•↟↟、尿液✘▩•↟↟、胸腹水✘▩•↟↟、灌洗液✘▩•↟↟、腦脊液✘▩•↟↟、細胞培養上清✘▩•↟↟、組織勻漿等標本·☁•。
臻科生物供應的種屬有▩↟│▩:昆蟲✘▩•↟↟、大鼠✘▩•↟↟、小鼠✘▩•↟↟、豚鼠✘▩•↟↟、兔子✘▩•↟↟、昆蟲✘▩•↟↟、豬牛羊✘▩•↟↟、雞鴨鵝✘▩•↟↟、植物ELISA試劑盒等·☁•。
二✘▩•↟↟、實驗原理▩↟│▩:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中昆蟲保幼激素(JH)水平·☁•。用純化的昆蟲保幼激素(JH)抗體包被微孔板•╃▩↟╃,製成固相抗體•╃▩↟╃,往包被單抗的微孔中依次加入保幼激素(JH)•╃▩↟╃,再與HRP 標記的保幼激素(JH)抗體結合•╃▩↟╃,形成抗體-抗原-酶標抗體複合物•╃▩↟╃,經過*洗滌後加底物TMB 顯色·☁•。TMB 在HRP 酶的催化下轉化成藍色•╃▩↟╃,並在酸的作用下轉化成終的黃色·☁•。顏色的深淺和樣品中的保幼激素(JH)呈正相關·☁•。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值)•╃▩↟╃,透過標準曲線計算樣品中昆蟲保幼激素(JH)濃度·☁•。
三✘▩•↟↟、試劑盒組成▩↟│▩:
1 | 30 倍濃縮洗滌液 | 20ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標準品(240 pmol/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
四✘▩•↟↟、操作步驟▩↟│▩:
1✘▩•↟↟、準備試劑•╃▩↟╃,樣品和標準品
2✘▩•↟↟、加入準備好的樣品和標準品•╃▩↟╃,37℃反應30分鐘
3✘▩•↟↟、洗板5次•╃▩↟╃,加入酶標試劑•╃▩↟╃,37℃反應30分鐘
4✘▩•↟↟、洗板5次•╃▩↟╃,加入顯色A✘▩•↟↟、B,37℃顯色10分鐘
5✘▩•↟↟、加入終止液
6✘▩•↟↟、15分鐘之內讀OD值後計算
五✘▩•↟↟、試劑盒計算▩↟│▩:
以標準物的濃度為橫座標•╃▩↟╃,OD值為縱座標•╃▩↟╃,在座標紙上繪出標準曲線•╃▩↟╃,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線迴歸方程式•╃▩↟╃,將樣品的OD值代入方程式•╃▩↟╃,計算出樣品濃度•╃▩↟╃,再乘以稀釋倍數•╃▩↟╃,即為樣品的實際濃度·☁•。
六✘▩•↟↟、注意事項▩↟│▩:
1✘▩•↟↟、試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘後方可使用•╃▩↟╃,酶標包被板開封后如未用完•╃▩↟╃,板條應裝入密封袋中儲存·☁•。
2✘▩•↟↟、濃洗滌液可能會有結晶析出•╃▩↟╃,稀釋時可在水浴中加溫助溶•╃▩↟╃,洗滌時不影響結果·☁•。
3✘▩•↟↟、各步加樣均應使用加樣器•╃▩↟╃,並經常校對其準確性•╃▩↟╃,以避免試驗誤差·☁•。一次加樣時間控制在5分鐘內•╃▩↟╃,如標本數量多•╃▩↟╃,推薦使用排槍加樣·☁•。
4✘▩•↟↟、請每次測定的同時做標準曲線•╃▩↟╃,做復孔·☁•。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大於標準品孔di一孔的OD值)•╃▩↟╃,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)後再測定•╃▩↟╃,計算時請後乘以總稀釋倍數(×n×5)·☁•。
5✘▩•↟↟、封板膜只限一次性使用•╃▩↟╃,以避免交叉汙染·☁•。
6✘▩•↟↟、底物請避光儲存·☁•。
7✘▩•↟↟、嚴格按照說明書的操作進行•╃▩↟╃,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準·☁•。
8✘▩•↟↟、所有樣品•╃▩↟╃,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理·☁•。
9✘▩•↟↟、本試劑不同批號組分不得混用·☁•。
七✘▩•↟↟、特別提醒▩↟│▩:
1.標本採集後儘早進行提取•╃▩↟╃,提取按相關文獻進行•╃▩↟╃,提取後應儘快進行實驗·☁•。若不能馬上進行試驗•╃▩↟╃,可將標本放於-20℃儲存•╃▩↟╃,但應避免反覆凍融·☁•。
2.不能檢測含NaN3的樣品•╃▩↟╃,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性·☁•。