布魯氏菌病是一種亞急性或慢性的疾病▩✘◕│╃,可造成多種動物發病▩✘◕│╃,本質上是一種動物疾病▩✘◕│╃,特別是家畜易發病▩✘◕│╃,由布魯氏菌屬的細菌引起發病▩✘◕│╃,人類可作為宿主偶爾攜帶這類細菌☁·。偏好與人畜共患病潛能特徵有差異的細菌▩✘◕│╃,主要為₪☁:羊布魯氏菌▩✘◕│╃,豬布魯氏菌▩✘◕│╃,流產布魯氏菌和犬布魯氏菌☁·。
布魯氏菌檢測試劑盒利用實時熒光PCR原理▩✘◕│╃,主要用於布魯氏菌的定性篩查檢測☁·。檢測原理如下:
以基因工程表達布魯氏菌蛋白作檢測和捕獲抗原▩✘◕│╃,採用“雙抗原夾心法”膠體金免疫技術設計▩✘◕│╃,標記膠體金的抗原與樣本中特異性抗體形成複合物▩✘◕│╃,複合物在NC膜爬行的過程中與被包被在檢測線上的抗原特異性結合而被固定和富集於檢測線▩✘◕│╃,使檢測線顯紅色反應▩✘◕│╃,以試劑檢測線顯色與否反應來判斷樣品是否存在布魯氏菌抗體☁·。
布魯氏菌檢測試劑盒操作步驟₪☁:
1.從試劑盒中分別取出熒光反應液││•│、陰性對照││•│、陽性對照☁·。
2.在室溫下溶解後▩✘◕│╃,充分震盪混勻▩✘◕│╃,瞬時離心☁·。
3.取出PCR八連管▩✘◕│╃,放在PCR板上☁·。
4.在PCR八連管內分裝熒光反應液▩✘◕│╃,分別向多個PCR管中加入提取好的樣品核酸▩✘◕│╃,其餘兩個管內分別加入陰性對照和陽性對照☁·。完成後蓋上管蓋▩✘◕│╃,並在右上角做好標記☁·。
5.將標記好的PCR八連管放入儀器震盪混勻後瞬時離心▩✘◕│╃,取出後拿起觀察有無氣泡☁·。
6.開啟熒光定量PCR儀器▩✘◕│╃,將PCR八連管放入卡槽中▩✘◕│╃,蓋上儀器☁·。
7.點選實驗程式▩✘◕│╃,選擇新建實驗▩✘◕│╃,點選執行程式▩✘◕│╃,並按照PCR八連管標記順序依次選擇孔位資訊₪☁:待測樣本││•│、陽性對照││•│、陰性對照☁·。
8.點選開始按鈕▩✘◕│╃,執行實驗☁·。
9.實驗完成後▩✘◕│╃,在螢幕檢視實驗結果▩✘◕│╃,點選詳細資料可檢視實驗資料▩✘◕│╃,進行資料回顧☁·。